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產品分類
Cassification
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詳細介紹
| 品牌 | Abnbio | 貨號 | ABG728-50 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 50X100ul | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 感受態細胞 | 應用領域 | 環保,食品/農產品,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
簡要說明
YM4271菌株，MATa型，可直接轉化質粒或與MATα型酵母菌株EGY48、Y187等通過mating操作進行蛋白互作驗證或篩庫試驗。Transformation marker為：trp1，leu2，ura，報告基因為： HIS3。可用于酵母雙雜，酵母單雜或異源蛋白表達等試驗。YM4271感受態細胞經特殊工藝制作pGADT7質粒檢測轉化效率>104 cfu/μg DNA。
操作說明
1、取一支無菌的1.5ml EP管，依次加入預冷的目的質粒1-3µg，Carrier DNA 10µl(95-100 度5min 快速冰浴，重復一次)，100µl冰上融化的感受態細胞，PEG/LiAc 500µl，輕輕翻轉混勻6-8次；
2. 30℃水浴30min，每10min輕輕翻轉混勻6-8次；
3. 每支加入20µl的二甲基亞砜；（用于提高轉化效率,可不做）
4. 42℃水浴15min，每5min輕輕翻轉混勻6-8次；
5. 12000rpm瞬時離心棄上清，每支加入1ml的YPDPlus于30℃復蘇1h；（用于提高轉化效率，可不做）
6. 12000rpm瞬時離心棄上清，用100µl 0.9%NaCl重懸，涂板，30℃培養48-96h。
注意事項
1、感受態細胞最好在冰上融化。
2. PEG溶液在低溫環境下會析出，請于常溫下溶解后使用。
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