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產品分類
Cassification
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詳細介紹
| 品牌 | Abnbio | 貨號 | ABG714-50 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 50X100ul | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 感受態細胞 | 應用領域 | 環保,食品/農產品,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
基因型
MATα; leu2-3,112; trp-901; his3Δ200; ade2-101;cyh2R;can1R ; gal4Δ; gal8Δ; GAL1::lacZ;HIS3UASGAL1::HIS3@LYS2; SPAL10::URA3
簡要說明：
MAV203菌株是life公司開發的GAL4系統酵母雙雜實驗用菌株，MATα型，可直接轉化質粒操作進行蛋白互作驗證或篩庫試驗。MAV203有四個報告基因：Ura，HIS，Trp，Leu。MAV203感受態細胞經特殊工藝制作，pGADT7質粒檢測轉化效率>104cfu/μgDNA。
操作說明
1、取一支無菌的1.5ml EP管，依次加入預冷的目的質粒1-3µg，Carrier DNA 10µl(95-100 度5min 快速冰浴，重復一次)，100µl冰上融化的感受態細胞，PEG/LiAc 500µl，輕輕翻轉混勻6-8次；
2. 30℃水浴30min，每10min輕輕翻轉混勻6-8次；
3. 每支加入20µl的二甲基亞砜；（用于提高轉化效率,可不做）
4. 42℃水浴15min，每5min輕輕翻轉混勻6-8次；
5. 12000rpm瞬時離心棄上清，每支加入1ml的YPDPlus于30℃復蘇1h；（用于提高轉化效率，可不做）
6. 12000rpm瞬時離心棄上清，用100µl 0.9%NaCl重懸，涂板，30℃培養48-96h。
注意事項
1、感受態細胞最好在冰上融化。
2. PEG溶液在低溫環境下會析出，請于常溫下溶解后使用。
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